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更新時間:2022-11-25
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大量研究表明積極,miRNAs的異常表達(dá)與腫瘤的發(fā)生和遷移高度相關(guān)探索。它被認(rèn)為是腫瘤早期診斷和臨床治療的潛在生物標(biāo)志物。最近的實驗證據(jù)表明產業,在血液中發(fā)現(xiàn)的所有類型的RNA也以相似比例存在于間質(zhì)液中滿意度。對無創(chuàng)采樣和個性化生理監(jiān)測的需求不斷增長,激發(fā)了人們對可作為生物標(biāo)志物信息庫的ISF進行探索的興趣可持續。因此主要抓手,開發(fā)一種強大的微創(chuàng)方法在皮膚ISF中取樣足夠的靶點是勢在必行的。由于miRNA在ISF中的表達(dá)水平較低構建,樣本量有限創新科技,因此對ISF中miRNA的檢測提出很大的挑戰(zhàn)。


DNA水凝膠呈現(xiàn)出三維聚合物網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)發展邏輯,其由 6 條單鏈 DNA(S-1 至 S-6)制備而成幅度,分為長雙鏈 DNA([S-1/S-2] n)和交聯(lián)劑(CL)。[S-1/S-2] n和 CL 都有懸浮的單鏈 DNA(綠色)重要的作用,DNA水凝膠是由二者懸浮單鏈之間的雜交形成的貢獻。天然聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)證實了DNA水凝膠的成功形成和Toehold介導(dǎo)的鏈置換過程。透射電子顯微鏡(TEM)圖像顯示了DNA水凝膠微粒平均大小為700 nm力度。此外明確了方向,進一步使用FL光譜分析來研究其可行性,與對照組相比靶miRNA引起的S-6置換觸發(fā)FL恢復(fù)(綠色曲線)勇探新路,而燃料探針的加入進一步導(dǎo)致FL急劇增加(紅色曲線)單產提升。

為了制備 MeHA/DNA-MN,將 MeHA 水溶液和 DNA 水凝膠充分混合製度保障,然后倒入 PDMS 模具中(該模具是利用摩方精密的nanoArch P150設(shè)備打印微針陣列預下達,結(jié)合PDMS翻模制成)的有效手段,在藍(lán)光照射下交聯(lián)并在室溫下干燥。最后方案,從模具中剝離干燥的 MeHA/DNA-MNs 貼片關鍵技術。獲得的 MeHA-MNs 貼片是15 × 15 的針頭陣列,尖.端鋒利深入,高度為 860 ± 10 μm技術研究,底寬約為 340 ± 10 μm,針間距約為 800 μm開展研究。放大掃描電子顯微鏡 (SEM) 圖像顯示MeHA/DNA 水凝膠具有均勻分布的孔隙姿勢,這種互穿網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)增加了 MN 的表面積和對樣品的提取。通過壓縮實驗證實了交聯(lián)的 MeHA-MNs 貼片和 MeHA/DNA-MNs 貼片具有相似的機械強度質生產力,表明 DNA 水凝膠對機械強度的影響很小適應性強。組織學(xué)研究顯示穿透深度為 250 ± 20 μm,表明 MN 可以穿透表皮(厚度為 50-150 μm)以到達(dá)真皮先進的解決方案。交聯(lián)的 MeHA/DNA-MNs 貼片在瓊脂糖凝膠中 15 分鐘內(nèi)可提取 86.6 ± 2.7 μL液體拓展。

為了測試 MN 貼片原位采樣和檢測 miRNA 的能力,首先研究了其在瓊脂糖凝膠和暴露于不同濃度 miRNA-155 的新鮮豬尸體皮膚中檢測 miRNA的性能宣講活動。結(jié)果表明不斷進步,在瓊脂糖凝膠中可檢測到低至 241.56 pM 的 miRNA。接著研究了其區(qū)分各種類型 miRNA 的能力效率,miRNA-155產(chǎn)生的FL強度分別是miRNA-205和miRNA-21產(chǎn)生的FL信號的2.19倍和2.39倍規模,這表明MNs檢測具有良好的特異性。使用新鮮豬尸體皮膚模型驗證了 MNs 對體外 miRNA 檢測的敏感性和選擇性適應性,與對照(沒有 miRNA 預(yù)處理)和 miRNA-205節點、miRNA-21 預(yù)處理相比,MNs 穿透與 miRNA-155 孵育的豬尸體皮膚顯示出更高的 FL 發(fā)射落地生根,有力地證實了 MeHA/DNA-MNs 具有很好的在采樣和分析皮膚 ISF 中的 miRNA 方面的潛力的特點。

全文鏈接:
https://doi.org/10.1021/acsnano.2c06261
來源:高分子科學(xué)前沿